一、肌肉中已烷雌酚的GC-MS测定（论文文献综述）
郭添荣[1]（2021）在《动物源食品中兽药残留的高通量筛查方法研究》文中研究说明动物源食品基质复杂且各类残留兽药含量甚微且极性差别大,传统的兽药残留检测方法多数仅对具有同类基本结构的兽药进行检测,难以实现对不同化学结构的多种兽药同时检测。建立一套范围宽广、快速高效的兽药残留高通量筛查方法具有重要意义。为此,本论文基于UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS联用技术探讨了动物源食品中兽药残留的高通量非靶向筛查分析检测方法。主要研究内容及结果如下:（1）通过对液相色谱条件和静电场轨道阱高分辨质谱条件的研究,得到最佳的液相色谱和质谱分析条件,并在讨论离子化方式、离子加合模式和质谱碰撞能量的基础上建立了可同时筛查128种兽药的仪器分析方法。（2）利用Trace Finder软件构建了激素类、β-受体激动剂、磺胺类等5大类128种兽药化合物的基本化学信息的数据库,利用标准溶液在最佳仪器分析条件的基础上,获取128种兽药化合物的保留时间、母离子加合模式和质荷比、子离子质荷比等色谱和质谱指纹信息构建。从母离子精确质荷比、色谱保留时间分布、同分异构体鉴别、同位素特征4个方面分析评价了该质谱数据库,并确定了数据库筛查参数,同时以加标阳性样品预筛查验证,确保了后期药物定性筛查的准确性。（3）选取了猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉、猪肝、鸡肝以及鱼肉等10种不同基质样品,通过对样品提取与净化条件的优化和针式滤膜的选择,开发了基于Oasis?PRi ME HLB固相萃取小柱的改良通过式固相萃取前处理方法。采用基质匹配标准曲线法定量,并从基质效应,方法的线性范围、检出限以及定量限,加标回收率和精密度等方面对建立的定量检测方法进行验证,各检测化合物在线性范围内呈良好的线性关系,方法的灵敏度、准确度和精密度均满足兽药残留检测分析要求。（4）用所建的非靶向高通量筛查检测方法,对市销的148批次动物源食品进行了兽药残留筛查检测,在94批次样品中检出兽药化合物残留,占采样量的63.5%,且存在一定数量的样品同时检出多种兽药。大多数检出药物虽然高出检出限,但却低于标准值,对照我国现行的兽药残留标准限量,发现问题样品2批次,占采样量的1.35%。总之,本研究建立的方法具有高通量、高精度、高可靠性和高灵敏度等显着优势,具有快速锁定与多目标确证潜在风险物质并准确定量性的优点,可有效节约资源和提高检测效率,是一种提升动物源食品中兽药残留监测与治理效能的有力手段。
肖雨萌[2]（2020）在《纳米氧化铜及电化学活化修饰电极的制备与应用》文中研究表明化学修饰电极诞生以来,一直是电化学领域比较活跃的研究方向,由于它制备起来相对容易且选择性好,其在环境、能源、生命、电子以及材料学等诸多领域的应用也日渐广泛。而纳米材料在近些年的研究中,通过自身的协同效应,使电子在电极表面的传递速率加快,将其修饰到电极表面制成修饰电极后,能够高选择性地表达预期的反应,因此,纳米材料在电分析化学领域也充当着十分重要的角色。基于此,本论文研究了所制备的修饰电极在不同条件下的性能,实现了对于L-半胱氨酸（L-Cysteine,L-Cys）和双烯雌酚的测定,具体工作及实验结论如下:第一部分主要对化学修饰电极的定义、发展历程、制备方法和特点进行了概括,介绍了纳米材料的概念、自身特点、分类方法及应用,列举了化学修饰电极在L-Cys和双烯雌酚中的检测方法和应用研究,并对本文的选题背景及研究的主要内容进行说明。第二部分为纳米氧化铜材料修饰电极测定L-Cys。研究建立了一种电化学测定L-Cys的新方法。我们首先采用电化学沉积的手段,制得纳米氧化铜修饰电极（即nano Cu O/GCE）,接下来,以该电极为工作电极,利用循环伏安法对L-Cys的电化学行为进行分析。实验结果证明,此修饰电极相对于裸玻碳电极而言,对L-Cys的检测表现出更好的电催化活性,通过一系列实验条件的优化,我们得出L-Cys与其氧化峰电流在1.00×10-9～1.20×10-7 mol/L和1.20×10-7～1.20×10-5 mol/L范围内,线性良好,检测限为1.13×10-10 mol/L,RSD为4.72%,在对实际样品的检测中也有不错的效果。第三部分是双烯雌酚在石墨电极上的电化学行为及测定。本章我们首次报道了利用循环伏安法,在活化后的石墨电极上,对双烯雌酚进行测定。通过考察电极性质、是否活化、不同扫速、底液、p H大小以及富集时间等条件,确定了双烯雌酚在石墨电极上检测的最佳条件。结果表明,石墨电极在活化后对双烯雌酚的氧化催化作用更明显,在优化条件下,测定双烯雌酚的线性范围在6.00×10-7～1.00×10-5 mol/L之间,检出限可达2.9×10-8 mol/L,该方法分析速度快、灵敏度高、重现性、稳定性较好。
袁宏宇[3]（2020）在《典型雌激素分析方法建立及其在洱海和污水处理厂中的分布特征》文中认为洱海是云南省第二大高原淡水湖泊,是整个洱海流域乃至大理州社会经济可持续发展的基础,目前处于富营养化初级阶段,除了常规污染外,具有内分泌干扰效应的新型有机物污染物—雌激素物质污染同样不容忽视。本文针对典型雌激素物质开展研究,旨在建立一种可快速批量测定水体中典型雌激素物质的分析方法,并明确雌激素物质在洱海水体中的污染现状以及在周边污水处理厂中的浓度特征和去除效率等关键科学问题。针对水体中雌酮（E1）、17α-雌二醇（α-E2）、17β-雌二醇（β-E2）、雌三醇（E3）、17α-乙炔基雌二醇（EE2）、双酚A（BPA）等6种典型雌激素物质,建立了固相萃取—微波衍生化—气相色谱-质谱联用快速分析测定方法。对色谱柱升温程序、固相萃取及衍生化条件进行了优化,色谱柱最佳升温程序为:初始温度50℃,保持2 min;以20℃/min速率升至260℃,保持5 min;最后以10℃/min速率升至280℃,保持5 min。在选取HC-C18萃取小柱、添加BSTFA（含1%TMCS）+吡啶作为衍生化试剂、微波315 W衍生化加热4 min的条件下,6种目标物标准曲线相关系数均大于0.999,BPA、E1、EE2及E3的线性范围为3～300 ng/L;17α-E2及17β-E2的线性范围为5～300 ng/L,方法检出限为2.0～5.0 ng/L,加标回收率为76.45%～96.24%。研究了典型雌激物质在洱海水体中的空间分布和丰枯性浓度特征以及对常规水质指标进行了同步分析测定。在洱海17个水质监测点的水样中,17β-E2均未被检出,其余5种雌激素物质检出率为100%;BPA在洱海17个水样监测点位的浓度范围为7.22～61.97ng/L、E1浓度范围为7.04～314.65ng/L、17α-E2浓度范围为3.05～10.05ng/L、EE2浓度范围为4.32～34.04ng/L、E3浓度范围为8.94～230.37ng/L,表明洱海水体已经遭受到了一定水平的雌激素污染。洱海枯水期∑5ES含量的平均值为130.97ng/L高于丰水期平均值40.52ng/L,15个点位的枯水期∑5ES浓度高于丰水期。常规水质指标检测结果表明洱海北部水域的总氮和总磷浓度明显高于其他区域;整体水质处于II类水至III类水标准区间。研究了三种污水处理工艺对典型雌激素物质的去除效果。氧化沟工艺对5种雌激物质的去除率范围为92.74～98.42%,去除率均在90%以上,去除效果显着;而A2/O+MBR工艺对上述5种雌激物质的去除率范围为-25.59%～91.49%,波动范围较大,对BPA和E3的去除效果较好,对17α-E2和E1的去除效果相对较差,而对EE2几乎无任何去除效果;A2/O工艺对5种雌激物质的去除率范围为70.05～94.07%,对17α-E2去除效果相对较差。
冒玉娟,王婧,刘佳敏,张盼盼[4]（2019）在《己烯雌酚残留检测研究进展》文中指出己烯雌酚是人工合成雌激素中作用最强的一种,曾一度作为促生长剂应用于畜牧养殖业。研究发现,其在动物性产品中的残留对人体健康和生态环境都会造成严重危害。阐述了己烯雌酚的残留特点及其危害,重点对其残留检测方法的研究进展进行了综述。
张昵昵[5]（2019）在《中药饲料添加剂中同时检测7种非法添加物的HPLC方法的建立》文中认为中药饲料添加剂因其能提高动物生产性能、无污染、无残留等优势,近年来在养殖业中被广泛应用。但调查发现,市场上销售的中药饲料添加剂有时会非法添加化学物质。本研究根据近年来国内中药饲料添加剂的非法添加情况,选取催情散、保胎无忧散、健胃散、降脂增蛋散共4种中药饲料添加剂,对其中可能添加的雌二醇等7种非法添加物,采用高效液相色谱（HPLC）法在相同的条件下进行检测。检测方法建立如:（1）色谱条件采用C18色谱柱（250 mm*4.6 mm,5 μm）,梯度洗脱流动相A:水,流动相B:乙腈,柱温40℃,检测波长为230nm,流速为1.0 min。采用该HPLC条件,对7种化学成分进行专属性、线性关系、检测限和定量限、精密度以及添加回收试验的测定。（2）方法验证性试验在上述色谱条件下,7种化学物质能够被分离,且都为单一物质峰,呋喃西林、呋喃妥因、硝呋酚酰肼、雌三醇、雌二醇、雌酮、双烯雌酚的出峰保留时间依次为:6.853 min、10.170 min、15.770 min、16.097 min、20.455 min、22.263 min、23.043 min;所检测的成分线性关系良好（r>0.9992）;7种化学成分在不同样品中的平均加样回收率和相对标准差（RSD）分别为:100.5%-103.04%、3.6%-4.8%;100.7%-102.4%、1.7%-2.6%;103.3%-104.6%、1.5%-2.3%;101.3%-%-102.9%、1.7%-2.7%;精密度、稳定性、重复性考察也符合分析要求。结论:本研究成功建立了同时检测4种中药饲料添加剂中非法添加7种化学物质的HPLC方法。该方法可在相同色谱条件下同时检测多种化学物质,与已有的检测方法相比,简化了检测程序,且精密度和稳定性良好。
范栋杰[6]（2019）在《4类风险因子检测技术的建立及在电商水产品中的应用》文中提出在互联网的背景下,电商行业渗透进了人们生活的方方面面,从传统的服装、家居、日用品等行业拓展到了包括水产品在内的食品及农产品行业。面对电商产品质量监管的挑战,我国修订并完善了许多相关法律法规和规范要求,使电商行业逐渐走向规范化。但电商水产品由于抽样、取证、溯源、追责等方面的特殊性,导致其在质量监管工作中存在许多空白点和薄弱环节。本文借鉴传统线下交易中水产品生产、加工和流通环节的抽样检测和风险监测,建立了4种风险因子的检测技术,对质量安全存在隐患的高危电商水产品进行研究,具体研究内容如下:（1）于2017年从淘宝、天猫、京东及苏宁易购等主流电商平台随机购买89批次样品、2018年随机购买74批次样品,共计163批次,样品种类包括鱼类、虾类、蟹类及休闲食品类。在抽样过程中发现了商家拒绝抽样、无法开具发票或发票信息不符、实际产品信息和线上宣传信息不吻合等问题。（2）运用电感耦合等离子体质谱（inductively coupled plasma mass spectrometry,ICPMS）检测技术对电商水产品中铅、镉、铬、锡、镍、砷、钒和钴8种有害元素进行同时测定。各元素在其线性范围内相关性良好,相关系数r2都大于0.999,质控样品8种有害元素含量测定值均处于标准值范围内,RSD（n=6）小于4.51%,该方法适用于电商水产品中有害元素含量的常规分析。样品测定结果表明,电商呛蟹样品中Cd含量较高,因此重点对电商呛蟹Cd含量及其膳食风险进行了评估。电商呛蟹中Cd膳食暴露量低于每月可耐受摄入量（provisional tolerable monthly intake,PTMI）推荐量（25μg/kg b.w.）,目标危害商数值（target hazard quotient,THQ）均小于1,说明电商呛蟹Cd污染食用风险较低,但Cd在生物体内半衰期较长,长期大量食用电商呛蟹仍存在健康风险。（3）建立分散固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法（dispersive solid-phase extraction--ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,DSPEUPLC-MS/MS）测定电商水产品中10种雌性激素的检测技术。样品经乙腈提取提、Na Cl盐析后,氮吹浓缩后用甲醇/水（1:1,v/v）复溶,加入N-丙基乙二胺固相吸附剂(（N-propyl ethylenediamine solid phase adsorbent,PSA）净化,离心,上清液经ACQUITY UPLC BEH C18柱分离,孕激素和雌激素分别在电喷雾正负离子模式下以多反应监测方式测定。结果表明10种雌性激素在1.0050.0μg/L范围内线性关系良好,相关系数r2大于0.997。10种雌性激素在2.00、5.00、20.0μg/kg 3个加标水平的平均回收率在79.4%110%之间,RSD（n=6）均小于6.04%。该方法简单快捷,有机溶剂用量少,灵敏度高,重复性好,适用于电商水产品中10种雌性激素的日常检测。（4）利用离子液体（ionic liquid,IL）作为分散液液微萃取（dispersive liquid-liquid microextraction,DLLME）的萃取溶剂,结合超高效液相色谱法（ultra performance liquid chromatography,UPLC）测定电商水产品中罗丹明B、碱性嫩黄O、碱性橙21及碱性橙22含量。对影响萃取效率的关键参数进行了优化,如离子液体的种类及用量、离心时间、涡旋时间、温度等,对比了超声加热辅助（ultrasound assisted-temperature controlled,UA-TC）-IL-DLLME及涡旋辅助（vortex-assisted,VA）-IL-DLLME的分析性能。实验结果表明4种碱性染料在5.00200μg/L范围内线性关系良好,相关系数r2均大于0.999,回收率为90.2%107%,RSD（n=6）小于5.83%。方法简单快捷,绿色环保,重复性好,成本低适用于电商水产品中4种碱性染料的日常检测。（5）采用液相色谱-同位素质谱（liquid chromatography-isotope ratio mass spectrometry,LC-IRMS）和ICP-MS对吕泗渔场、舟山渔场、青海渔场及闽南渔场4个地区24个批次的电商带鱼中稳定同位素比值（δ13C和δ15N）以及多元素（Na、Mg、K、Ca、Mn、Fe、Cu、Zn、As、Sr）含量进行测定,基于其稳定同位素比值和元素组成的差异,结合聚类分析（cluster analysis,CA）和主成分分析（principal components analysis,PCA）建立判别模型,对四个地区的电商带鱼进行产地区分研究。方差分析（analysis of variance,ANOVA）表明,各地区电商带鱼中稳定同位素比值和元素组成具有明显的地域特征,其中9种元素含量差异显着。CA表明,样品产地的判别正确率为83.3%。PCA表明,前3个主成分（累计方差贡献率为82.0%）的得分散点图分成了四个相对集中的区域,彼此之间没有重叠,能够有效地区分电商带鱼产地。本研究结果表明,利用稳定同位素和多元素检测结合CA及PCA能够对电商带鱼进行有效的产地区分,实用性良好。（6）依据建立的方法及相关国家标准对163批次电商水产品中有害元素、雌性激素、碱性染料、产地、添加剂、标签风险因子进行监测。分析风险监测结果,结合电商水产品质量现状,发现我国水产品电商行业存在着产品的标准化和品牌化不足、商家对产品质量把关不严、电商平台未发挥作用和相关法律尚不健全等问题。只有加强电商水产品的品牌化建设、提升电商水产品质量、发挥电商平台监管作用、创新政府监管机制才能更好地推动我国电商水产品的质量监管工作,使我国电商水产品的质量得到更安全的保障。
周秋玲,娄婷婷,王素英,张宏宇[7]（2018）在《动物源性食品中性激素检测方法的比较分析》文中研究表明动物源性食品中激素的残留会影响人体内的正常激素功能,因此需要开发具有低检出限、高灵敏度的检测方法,以保证食品安全。分析动物源性食品中性激素残留对人体造成的可能危害,综述我国现行的动物源性食品中性激素的检测标准并对近年来国内外动物源性食品中性激素的提取、净化及检测方法的前景和局限性进行展望和分析。重点讨论高灵敏度的色谱-质谱法在动物源性食品性激素残留检测中的研究进展及应用前景,希望为检测人员及相关研究者提供参考和借鉴。
高旭东,黄鑫,郝宝成,陈士恩,梁剑平[8]（2015）在《动物源性食品中性激素残留的危害及检测方法》文中研究说明我国畜牧业资源丰富,且食品开发及加工业也已跃居成为我国国民经济的主要支柱产业之一,工农业发展和人们生活水平的提高也必将受其影响。文章参考国内外有关激素残留相关文献,重点介绍目前动物源食品中性激素残留的危害及检测方法,并对前景进行了展望。
杨兴东[9]（2015）在《己烯雌酚残留免疫学快速检测研究》文中进行了进一步梳理己烯雌酚（Diethylstilbestrol,DES）属于非甾体雌激素,具有促进动物生长和提高动物瘦肉率等作用,曾经被当作促生长剂普遍应用于畜禽生产中,因其对人类有很强的致畸、致癌等毒副作用,大多数国家和地区已明确规定禁止在畜牧养殖中使用DES。为了降低动物生产成本,不规范使用己烯雌酚的现象仍然存在。传统的理化检测技术虽然能够监测动物源性食品中的DES残留,但其存在用时长、、程序繁琐费用高等不足,因此急需建立一种迅速、简便、灵敏、准确、成本低的分析方法。本研究应用已制备的免疫原DES-BSA和己烯雌酚单克隆抗体（DES McAb）制备了间接竞争ELISA（ci-ELISA）试剂盒（DES-Kit）和免疫胶体金标记快速检测试纸条（DES-Strip）,并用液相色谱法（HPLC）和气-质联用法（GC-MS）对DES-Kit和DES-Strip的性能进行验证。1.在分析DES分子结构和免疫原性的基础上,经过一系列化学反应在DES苯环的羟基（-OH）位点上引入活性基团羧基（-COOH）,合成具有半抗原结构特征的己烯雌酚-单-羧基丙基-醚（DES-MCPE）,利用活性酯法使DES-MCPE与牛血清白蛋白（BSA）发生偶联,合成免疫原DES-BSA, DES-MCPE与鸡卵清蛋白（OVA）偶联,制备包被抗原DES-OVA。利用紫外扫描（UV）和SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）进行初步鉴定,实验结果显示,DES-BSA紫外扫描图的最大吸收峰发生偏移,DES-BSA的泳动率小于BSA,判定DES-BSA偶联成功,并测得DES与BSA分子结合比为12.8：1。用免疫原DES-BSA免疫3只BALB/c小鼠,5次免疫后获得了抗DES多克隆抗体（DES pAb）,用间接ELISA检测DES pAb的效价均大于1：1.0×104,用cz-ELISA检测DESpAb的半数抑制浓度（IC50）,其中测定结果最好的2号小鼠的IC50为18.221 μg/L,与己烷雌酚（HEX）和双烯雌酚的（DIEN）交叉反应率（CR%）分别为8.09%、3.63%与其他竞争物没有交叉反应（CR）。获得了灵敏、特异、高效价的多克隆抗体。2.利用ELISA筛选细胞融合鼠,应用融合剂聚乙二醇（PEG4000）使SP2/0瘤细胞与免疫小鼠的脾细胞发生融合,生成的杂交瘤细胞进一步筛选、克隆和扩大培养后,采用体内诱生腹水法生产己烯雌酚单克隆抗体（DES McAb）,选取4株敏感性和选择性均好的抗DES杂家瘤细胞：1B8 DES McAb、2 C4DES McAb、4 Al DES McAb、4 C7 DES McAb,其细胞上清效价分别为：1：2.56×102、1：4.0×102、1：1.2×102、1：8.0 × 102,腹水效价分别为：1：2.0×105、1：2.56×105、1：128×105、1：5.12×105,亲和常数（Ka）分别为：3.38×109、9.27×109、2.30×109、1.87×1010 L/moL,单抗亚型分别为：]gG2a/κ、IgGl/κ、IgG2a/κ、IgG2a/K。ci-ELISA测定亲和力最高的4C7株的IC50为0.49μg/L,与HEX和DIEN的CR%分别为7.66%、3.83%,与其他竞争物没有CR。3.以DES McAb为基础,优化了ci-ELISA最佳实验条件。DES-OVA的包被浓度为0.5μg/mL, DES McAb的工作浓度为1：6.4×104；酶标二抗（GaMIgG-HRP）的稀释浓度为1：1×103；最佳包被条件为37℃,包被原DES-OVA孵育120min,37℃,5%的猪血清封闭60min；室温条件下,显色时间为TMB显色液作用10min。绘制出的ci-ELISA DES-Kit的标准曲线显示为典型的S型,与4参数logit曲线拟合相符,IC50为0.49ng/mL,检测限为0.5 ng/mL;阴性的鲫鱼肉、猪肉平均回收率分别为79.3%和81.63%,平均变异系数（CV）分别为9.28%、8.70%,平均批内CV分别为9.7%、9.3%,平均批间CV分别为7.6%、7.0%,平均批内CV和平均批间CV均小于10%；与HEX和DIEN的CR%分别为6.53%、3.42%,与其他竞争物没有CR；在4℃、避光条件下,DES-Kit可存放6个月。4.建立了胶体金的制备条件：以柠檬酸三钠（Na3C6H5O7·2H2O）作为还原剂,1.0%的氯金酸与1.0%的Na3c6H5O7·2H2O最佳的作用剂量比为1mL:1.7 mL,金颗粒直径为25 nm；胶体金标记DES McAb的最佳标记浓度为7.2 μg/ml。应用胶体金免疫层析试验（GICA）原理和获得的DES McAb制备DES-Strip, DES-Strip的标准曲线显示为典型的S型,机读检测限为0.25 μg/L,目测检测限为2.0μg/L,10min内即可完成测定,与其类似物没有CR,在4℃干燥条件下DES-Strip的保存期为9个月。5. HPLC的确证检测显示,DES-Kit与HPLC的差异为2.7%～4.3%,DES-Strip与HPLC的差异为1.5%-4.9%；GC-MS的确证检测显示,DES-Kit与GC-MS的差异为1.4%～4.1%,DES-Strip与GC-MS的差异为1.0%-4.6%,实验结果表明,4种方法的测定结果无明显差异,测定结果基本相同。
徐英江,黄会,田秀慧,刘慧慧,薛敬林,孙岩,任传博,宫向红[10]（2014）在《己烯雌酚和双烯雌酚对生物的影响及分析方法研究进展》文中指出己烯雌酚和双烯雌酚是结构相近的人工合成雌激素,曾广泛应用于妇科疾病的治疗和动物生长的促进,但如果长期使用则会对人体产生明显的毒害作用。本文详细阐述了己烯雌酚和双烯雌酚对水生生物和哺乳动物的影响,及其在环境和生物样品中残留量测定的预处理方法和仪器分析方法,并展望了己烯雌酚和双烯雌酚的研究方向,旨在为建立更加高效、安全、环保和便捷的己烯雌酚和双烯雌酚分析方法提供参考。
二、肌肉中已烷雌酚的GC-MS测定（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、肌肉中已烷雌酚的GC-MS测定（论文提纲范文）
（1）动物源食品中兽药残留的高通量筛查方法研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 研究背景及意义 |
| 1.2 常见易残留兽药的分类 |
| 1.2.1 激素类 |
| 1.2.2 β-受体激动剂 |
| 1.2.3 磺胺类抗菌素药物 |
| 1.2.4 喹诺酮类抗菌素药物 |
| 1.2.5 大环内酯类抗生素药物 |
| 1.3 兽药残留的危害及限量标准 |
| 1.4 动物源食品中兽药残留样品前处理技术 |
| 1.4.1 萃取技术 |
| 1.4.2 凝胶渗透色谱(GPC) |
| 1.4.3 免疫亲和层析(IAC) |
| 1.4.4 超声波辅助提取(SAE) |
| 1.4.5 QuEChERS方法 |
| 1.5 动物源食品中兽药残留检测方法 |
| 1.5.1 酶联免疫吸附法(ELISA) |
| 1.5.2 分子印迹技术(MIT) |
| 1.5.3 液相色谱法(LC) |
| 1.5.4 气相色谱串联质谱法(GC-MS/MS) |
| 1.5.5 液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS) |
| 1.6 超高效液相色谱-高分辨质谱联用分析技术 |
| 1.6.1 超高效液相色谱(UHPLC) |
| 1.6.2 高分辨质谱(HRMS) |
| 1.6.3 UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS技术及其在动物源食品兽药检测中的应用 |
| 1.7 本论文研究的目的及意义 |
| 2 兽药仪器分析方法的建立 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 仪器与设备 |
| 2.2.2 试剂与耗材 |
| 2.2.3 标准品物质 |
| 2.2.4 质量轴调谐校正 |
| 2.2.5 色谱-质谱条件 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 液相色谱条件的优化 |
| 2.3.2 高分辨质谱参数的优化 |
| 2.3.3 离子化方式和离子加合模式 |
| 2.3.4 碰撞能量的优化 |
| 2.4 本章小结 |
| 3 兽药高分辨质谱筛查数据库的构建 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 仪器与设备 |
| 3.2.2 试剂与耗材 |
| 3.2.3 标准品与标准溶液 |
| 3.2.4 色谱-质谱条件 |
| 3.2.5 数据库的构建 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 一级精确质量数(MS1)指纹识别数据库 |
| 3.3.2 二级HCD碎片离子(MS2)定性确证谱图库 |
| 3.3.3 精确质量数分析 |
| 3.3.4 色谱保留时间分析 |
| 3.3.5 同分异构体鉴别 |
| 3.3.6 数据库筛查参数的设置与验证 |
| 3.4 本章小结 |
| 4 高分辨质谱筛查数据库的应用研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 仪器与设备 |
| 4.2.2 试剂与耗材 |
| 4.2.3 样品准备与前处理 |
| 4.2.4 色谱-质谱条件 |
| 4.2.5 高通量筛查流程 |
| 4.2.6 数据分析 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 样品前处理方法优化 |
| 4.3.2 基质效应评价 |
| 4.3.3 方法的线性范围、检出限以及定量限 |
| 4.3.4 回收率与精密度 |
| 4.3.5 实际样品筛查验证 |
| 4.4 本章小结 |
| 5 市售动物源食品中兽药残留筛查分析 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 仪器与设备 |
| 5.2.2 试剂与耗材 |
| 5.2.3 样品准备与前处理 |
| 5.2.4 仪器分析条件 |
| 5.2.5 数据分析 |
| 5.2.6 兽药残留高通量筛查与分析检测 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 市售大宗动物源食品中兽药残留筛查确证结果 |
| 5.3.2 市售大宗动物源食品中兽药残留含量分析 |
| 5.4 本章小结 |
| 6 结论与展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 展望 |
| 参考文献 |
| 附录A 英文缩略表 |
| 附录B 兽药数据库信息 |
| 附录C 方法的线性关系、检出限以及定量限 |
| 附录D 10类基质中128种兽药的回收率和精密度 |
| 攻读硕士学位期间承担的科研任务及主要成果 |
| 致谢 |
（2）纳米氧化铜及电化学活化修饰电极的制备与应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 化学修饰电极定义 |
| 1.2 化学修饰电极发展概述 |
| 1.3 化学修饰电极的制备 |
| 1.3.1 电极的预处理 |
| 1.3.2 预处理的目的 |
| 1.3.3 预处理的步骤 |
| 1.3.4 化学修饰电极的制备方法 |
| 1.4 化学修饰电极材料 |
| 1.4.1 纳米功能材料的定义 |
| 1.4.2 纳米材料的特性 |
| 1.4.3 纳米功能材料的分类 |
| 1.4.4 纳米材料的应用 |
| 1.5 L-Cys的检测方法及应用研究 |
| 1.5.1 L-Cys的概述 |
| 1.5.2 L-Cys在生物催化方面的应用 |
| 1.5.3 L-Cys的检测方法及研究进展 |
| 1.6 雌激素概述及分类 |
| 1.6.1 双烯雌酚的概述 |
| 1.6.2 测定双烯雌酚的方法及应用 |
| 1.7 本论文选题背景及主要研究内容 |
| 2 纳米氧化铜修饰电极测定L-Cys |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 仪器与试剂 |
| 2.2.2 修饰电极的制备 |
| 2.2.3 L-Cys的测定 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 L-Cys在裸玻碳电极与修饰电极上的电化学行为 |
| 2.3.2 Nano CuO/GCE修饰电极的电沉积过程 |
| 2.3.3 不同沉积电位对L-Cys峰电流的影响 |
| 2.3.4 不同沉积圈数对L-Cys峰电流的影响 |
| 2.3.5 不同底液对L-Cys峰电流的影响 |
| 2.3.6 pH的影响 |
| 2.3.7 富集时间的影响 |
| 2.3.8 扫描速度的影响 |
| 2.3.9 线性范围、检出限 |
| 2.3.10 干扰实验 |
| 2.3.11 电极的重现性与稳定性 |
| 2.3.12 实际样品的测定 |
| 2.3.13 不同修饰电极测定L-Cys的比较 |
| 2.4 结论 |
| 3 双烯雌酚在石墨电极上的电化学行为测定 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 仪器与试剂 |
| 3.2.2 电极的处理 |
| 3.2.3 实验方法 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 双烯雌酚在活化玻碳电极与石墨电极上的电化学行为 |
| 3.3.2 双烯雌酚在活化与未活化石墨电极上的伏安行为比较 |
| 3.3.3 双烯雌酚在活化石墨电极上的富集与溶出(机理分析) |
| 3.3.4 扫描速度的影响 |
| 3.3.5 富集时间的影响 |
| 3.3.6 底液及pH的影响 |
| 3.3.7 线性范围、检出限及重现性 |
| 3.3.8 干扰实验 |
| 3.3.9 实际样品测定及回收率 |
| 3.4 结论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（3）典型雌激素分析方法建立及其在洱海和污水处理厂中的分布特征（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 云南大理洱海流域介绍 |
| 1.1.1 自然地理特征 |
| 1.1.2 水环境污染现状 |
| 1.2 环境内分泌干扰物研究概述 |
| 1.2.1 环境内分泌干扰物的概念 |
| 1.2.2 环境内分泌干扰物的分类及来源 |
| 1.2.3 环境内分泌干扰物的特性 |
| 1.2.4 环境内分泌干扰物的毒性危害 |
| 1.3 环境内分泌干扰物分析方法 |
| 1.3.1 样品的采集与保存 |
| 1.3.2 样品的前处理 |
| 1.3.3 衍生化 |
| 1.3.4 分析检测技术 |
| 1.4 所研究六种典型雌激素物质介绍 |
| 1.4.1 物理及化学性质 |
| 1.4.2 雌激素在地表水及污水环境介质中的分布特征 |
| 1.5 课题研究意义与研究内容 |
| 1.6 技术路线 |
| 第二章 实验材料与方法 |
| 2.1 标准溶液配制与保存 |
| 2.2 试剂与仪器 |
| 2.2.1 试剂 |
| 2.2.2 仪器与材料 |
| 2.3 常规水质指标的测定方法 |
| 2.4 内分泌干扰物的测定方法 |
| 2.4.1 样品的固相萃取步骤 |
| 2.4.2 衍生化处理 |
| 2.4.3 GC-MS进样分析条件 |
| 第三章 水中典型雌激素物质的SPE-GC-MS检测方法的建立 |
| 3.1 色谱柱升温程序条件优化 |
| 3.2 色谱与质谱特征 |
| 3.3 衍生化条件优化 |
| 3.3.1 衍生化加热方式选择 |
| 3.3.2 微波衍生化条件 |
| 3.4 固相萃取小柱选择 |
| 3.5 目标物标准曲线、方法检出限及线性范围 |
| 3.6 方法加标回收率及精密度 |
| 3.7 与其他方法的比较 |
| 3.8 实际水样验证 |
| 3.9 本章小结 |
| 第四章 洱海水体中典型雌激物质的浓度分布特征 |
| 4.1 云南大理洱海水样采集及分析测定方法 |
| 4.1.1 洱海水域水样采样点介绍 |
| 4.1.2 洱海流域水样分析方法 |
| 4.2 洱海水体中典型雌激素物质在的浓度空间性分布特征 |
| 4.3 洱海水体中典型雌激素物质在的季节性浓度分布特征 |
| 4.4 洱海常规水质指标参数 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 典型污水处理厂中的的雌激素物质浓度分布特征及去除效果 |
| 5.1 氧化沟工艺污水处理厂中雌激素物质的浓度特征及去除效果 |
| 5.2 A~2/O+MBR工艺污水处理厂中雌激素物质的浓度特征及去除效果 |
| 5.3 A~2/O工艺污水处理厂中雌激素物质的浓度特征及去除效果 |
| 5.4 污水处理厂不同工艺对雌激素物质的去除效率 |
| 5.5 本章小结 |
| 第六章 结论与展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间已发表或录用的论文 |
（4）己烯雌酚残留检测研究进展（论文提纲范文）
| 1 己烯雌酚的应用 |
| 2 己烯雌酚的残留特点 |
| 3 己烯雌酚的危害 |
| 4 己烯雌酚残留检测技术的研究进展 |
| 4.1 理化检测方法 |
| 4.1.1 气相色谱法 (gas chromatography, GC) : |
| 4.1.2 高效液相色谱法 (high performance liquid chromatography, HPLC) : |
| 4.1.3 气相色谱—质谱联用 (gas chromatography-mass spectrometry, GC-MS) : |
| 4.1.4 液相色谱—质谱联用 (liquid chromatogra-phy-mass spectrometry, LC-MS) : |
| 4.2 免疫检测方法 |
| 4.2.1 放射免疫法 (radio-immunoassay, RIA) : |
| 4.2.2 酶联免疫吸附法 (enzyme-linked im-munosorbnent assay, ELISA) : |
| 4.2.3 免疫胶体金技术 (immune colloidal gold technique, GICT) : |
| 5 小结 |
（5）中药饲料添加剂中同时检测7种非法添加物的HPLC方法的建立（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 主要缩略词 |
| 文献综述 |
| 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 主要仪器 |
| 1.1.2 试剂 |
| 1.1.3 对照品 |
| 1.1.4 样品 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 溶液的制备 |
| 1.2.2 HPLC色谱条件的选择及方法考察 |
| 1.2.3 方法学考察 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 HPLC色谱条件的建立 |
| 2.1.1 确定洗脱程序 |
| 2.1.2 确定流速 |
| 2.1.3 确定检测波长 |
| 2.1.4 柱温的确定 |
| 2.2 方法学验证性试验结果 |
| 2.2.1 专属性试验结果 |
| 2.2.2 样品本底及干扰试验结果 |
| 2.2.3 阳性样品测定试验结果 |
| 2.2.4 线性关系与范围试验结果 |
| 2.2.5 检测限与定量限试验结果 |
| 2.2.6 日内精密度试验结果 |
| 2.2.7 日间精密度试验结果 |
| 2.2.8 稳定性试验结果 |
| 2.2.9 重复性试验结果 |
| 2.2.10 方法回收率试验结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 色谱柱的选择 |
| 3.2 流动相的选择 |
| 3.3 洗脱方式的选择 |
| 3.4 流速的选择 |
| 3.5 检测波长的选择 |
| 3.6 柱温的选择 |
| 3.7 样品前处理提取方法 |
| 3.8 影响HPLC方法检测数据的因素 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（6）4类风险因子检测技术的建立及在电商水产品中的应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 引言 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.1.1 国内电商水产品的交易平台 |
| 1.1.2 电商平台的监管现状 |
| 1.1.3 电商水产品存在的关键风险因子 |
| 1.2 风险因子检测技术研究现状 |
| 1.2.1 有害元素 |
| 1.2.2 雌性激素 |
| 1.2.3 碱性染料 |
| 1.2.4 产地区分 |
| 1.3 本课题的立项目的、意义及研究内容 |
| 1.3.1 研究目的及意义 |
| 1.3.2 研究内容 |
| 第二章 电商水产品的样品情况 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 样品来源 |
| 2.1.2 样品数量 |
| 2.1.3 样品种类 |
| 2.1.4 风险监测因子 |
| 2.2 分析 |
| 2.2.1 样品种类和监测因子的确定 |
| 2.2.2 样品数量及种类的统计 |
| 2.2.3 样品平台分布的统计 |
| 2.2.4 样品区域分布的统计 |
| 2.2.5 样品信息的汇总 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 电商水产品中有害元素检测及膳食风险评估 |
| 3.1 实验部分 |
| 3.1.1 材料与试剂 |
| 3.1.2 仪器与设备 |
| 3.1.3 实验方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 方法学评价 |
| 3.2.2 试剂空白中Cd含量分析 |
| 3.2.3 电商呛蟹与市售新鲜三疣梭子蟹Cd含量对比分析 |
| 3.2.4 电商呛蟹Cd的膳食风险评估 |
| 3.3 小结 |
| 第四章 雌性激素DSPE-UPLC-MS/MS检测技术的建立及在电商水产品中的应用 |
| 4.1 实验部分 |
| 4.1.1 材料与试剂 |
| 4.1.2 仪器与设备 |
| 4.1.3 实验方法 |
| 4.2 结果与讨论 |
| 4.2.1 前处理条件的优化 |
| 4.2.2 质谱条件的优化 |
| 4.2.3 色谱条件的优化 |
| 4.2.4 方法学验证 |
| 4.3 小结 |
| 第五章 碱性染料VA-IL-DLLME-UPLC检测技术的建立及在电商水产品中的应用 |
| 5.1 实验部分 |
| 5.1.1 材料与试剂 |
| 5.1.2 仪器与设备 |
| 5.1.3 实验方法 |
| 5.2 结果与讨论 |
| 5.2.1 离子液体种类的影响 |
| 5.2.2 离子液体用量的影响 |
| 5.2.3 离心时间的影响 |
| 5.2.4 温度及超声时间对UA-TC-IL-DLLME影响 |
| 5.2.5 涡旋时间对VA-IL-DLLME的影响 |
| 5.2.6 提取方式影响 |
| 5.2.7 方法学验证 |
| 5.3 小结 |
| 第六章 基于元素含量及稳定同位素比值区分电商带鱼的产地 |
| 6.1 实验部分 |
| 6.1.1 仪器与试剂 |
| 6.1.2 实验方法 |
| 6.1.3 数据处理 |
| 6.2 结果与讨论 |
| 6.2.1 不同地区电商带鱼的形态差异 |
| 6.2.2 不同地区电商带鱼中稳定同位素比值特征分析 |
| 6.2.3 不同地区电商带鱼中元素组成特征分析 |
| 6.2.4 不同地区电商带鱼中元素的聚类分析 |
| 6.2.5 不同地区电商带鱼中元素及稳定同位素的主成分分析 |
| 6.3 小结 |
| 第七章 电商水产品中几种风险因子的质量安全监测与跟踪报告 |
| 7.1 材料与方法 |
| 7.1.1 材料 |
| 7.1.2 样品制备 |
| 7.1.3 检测方法 |
| 7.2 结果与分析 |
| 7.2.1 检测结果 |
| 7.2.2 主要问题及原因浅析 |
| 7.3 问题与建议 |
| 7.3.1 电商水产品质量存在的问题 |
| 7.3.2 电商水产品质量问题原因浅析 |
| 7.3.3 电商水产品质量监管的建议 |
| 论文结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 |
（7）动物源性食品中性激素检测方法的比较分析（论文提纲范文）
| 1 动物源性食品中性激素的来源 |
| 2 动物源性食品中性激素残留的危害及相关检测标准 |
| 3 动物源性食品中性激素残留的检测研究进展 |
| 3.1 样品的提取及净化 |
| 3.2 动物源性食品中性激素的检测和评价方法的比较 |
| 4 色谱-质谱法在动物源性食品性激素检测中的研究进展 |
| 4.1 气相色谱—质谱法 |
| 4.2 液相色谱—质谱法 |
| 5 总结与展望 |
（8）动物源性食品中性激素残留的危害及检测方法（论文提纲范文）
| 1 性激素在畜牧业中的应用 |
| 2 动物源性食品中性激素残留的危害 |
| 3 动物性食品中性激素残留检测方法 |
| 3. 1 免疫分析法 |
| 3. 2 色谱分析法 |
| 3. 3 其他方法 |
| 4 结果 |
（9）己烯雌酚残留免疫学快速检测研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 研究进展 |
| 1 己烯雌酚的理化性质 |
| 2 己烯雌酚的药理作用 |
| 3 己烯雌酚的临床应用 |
| 3.1 DES在医学临床上的应用 |
| 3.2 DES在兽医临床上的应用 |
| 4 己烯雌酚的危害 |
| 4.1 DES对生殖系统的危害 |
| 4.1.1 DES对雄性生殖系统的危害 |
| 4.1.2 DES对雌性生殖系统的危害 |
| 4.2 DES对环境的危害 |
| 5 己烯雌酚在畜牧养殖业的应用规定 |
| 6 己烯雌酚的检测方法 |
| 6.1 理化检测法 |
| 6.1.1 气相色谱法(gas phase chromatography,GC) |
| 6.1.2 液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC) |
| 6.1.3 薄层色谱法(Thin-Layer Chromatography,TLC) |
| 6.1.4 联用技术 |
| 6.1.5 毛细管电泳法(Capillary Electrophoresis,CE) |
| 6.1.6 化学发光(CL)分析法 |
| 6.2 免疫检测法 |
| 6.2.1 ELISA(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA) |
| 6.2.2 胶体金免疫层析技术 |
| 7 本研究的背景、目的及意义 |
| 8 本研究的主要内容和技术路线 |
| 8.1 研究的主要内容 |
| 8.2 技术路线 |
| 第二章 己烯雌酚人工抗原的合成及抗血清的制备 |
| 1 材料 |
| 1.1 试剂和溶液 |
| 1.2 主要仪器设备 |
| 1.3 试验动物 |
| 2 方法 |
| 2.1 DES人工抗原的合成 |
| 2.1.1 己烯雌酚-单羧基丙基醚(DES-MCPE)的合成 |
| 2.1.2 DES-BSA免疫原、DES-OVA包被原的制备 |
| 2.2 DES人工抗原的鉴定 |
| 2.2.1 UV鉴定DES人工抗原 |
| 2.2.2 SDS-PAGE凝胶电泳鉴定DES人工抗原 |
| 2.3 DES抗血清(pAb)的制备 |
| 2.4 DES pAb的鉴定 |
| 2.4.1 DES pAb效价测定 |
| 2.4.2 DES pAb敏感性鉴定 |
| 2.4.3 DES pAb特异性测定 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 DES人工抗原的鉴定 |
| 3.1.1 UV鉴定结果 |
| 3.1.2 SDS-PAGE鉴定结果 |
| 3.2 DES pAb的鉴定结果 |
| 3.2.1 DES pAb间接ELISA检测结果 |
| 3.2.2 DES pAb敏感性鉴定结果 |
| 3.2.3 DES pAb特异性鉴定结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 DES-MCPE的合成 |
| 4.2 选择适宜的载体蛋白 |
| 4.3 半抗原的偶联比 |
| 4.4 免疫动物和免疫途径的选取 |
| 4.5 DES完全抗原的鉴定 |
| 5 小结 |
| 第三章 己烯雌酚单克隆抗体的制备及其免疫学特性的鉴定 |
| 1 材料 |
| 1.1 试剂与溶液 |
| 1.1.1 主要试剂 |
| 1.1.2 主要实验试剂的配制 |
| 1.2 主要仪器 |
| 1.3 试验动物 |
| 2 方法 |
| 2.1 杂交瘤细胞株的建立 |
| 2.1.1 选择细胞融合备用鼠 |
| 2.1.2 SP2/0骨髓瘤细胞(SP2/0 Myeloma cells)的准备 |
| 2.1.3 饲养细胞的制备 |
| 2.1.4 脾细胞的制备 |
| 2.1.5 细胞融合 |
| 2.1.6 杂交瘤细胞(Hybridoma cells)的筛选 |
| 2.1.7 克隆阳性杂交瘤细胞 |
| 2.1.8 Hybridoma cells的扩大培养 |
| 2.1.9 Hybridoma cells的冻存 |
| 2.2 DES McAb的制备 |
| 2.3 DES单克隆抗体(McAb)的鉴定 |
| 2.3.1 DES McAb效价的测定 |
| 2.3.2 DE SMcAb敏感性鉴定 |
| 2.3.3 DES McAb亲和力鉴定 |
| 2.3.4 间接ELISA鉴定DES McAb的亚型 |
| 2.3.5 DES McAb特异性鉴定 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 融合细胞的显微镜检查 |
| 3.2 杂交瘤细胞株的筛选 |
| 3.3 效价测定结果 |
| 3.4 敏感性鉴定结果 |
| 3.5 亲和力鉴定结果 |
| 3.6 亚型分析结果 |
| 3.7 特异性鉴定结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 影响细胞融合的因素 |
| 4.1.1 Myeloma cells系的选择 |
| 4.1.2 脾细胞的敏感性 |
| 4.1.3 饲养细胞的量 |
| 4.1.4 融合剂聚乙二醇的使用 |
| 4.2 杂交瘤细胞株的建立 |
| 4.3 DES pAb和DES McAb的对比 |
| 4.4 关于DES McAb的大量生产 |
| 4.4.1 体外细胞培养法 |
| 4.4.2 动物体内诱生法 |
| 4.5 DES McAb的鉴定 |
| 5 小结 |
| 第四章 己烯雌酚间接竞争ELISA试剂盒的研制 |
| 1 材料 |
| 1.1 试剂与溶液 |
| 1.2 仪器 |
| 1.3 杂交瘤细胞、DES McAb |
| 2 方法 |
| 2.1 DES检测ci-ELISA实验条件的优化 |
| 2.1.1 DES-OVA的包被浓度、DESMcAb的工作浓度的选取(方阵滴定实验) |
| 2.1.2 GaMIgG-HRP稀释浓度的选取 |
| 2.1.3 DES-OVA包被时间的选取 |
| 2.1.4 封闭液、封闭时间的选取 |
| 2.1.5 TMB显色液显色时间的选取 |
| 2.1.6 ci-ELISA方法的建立 |
| 2.1.7 绘制标准曲线 |
| 2.2 DES-Kit的配置、操作步骤和结果判定 |
| 2.2.1 DES-Kit的配置 |
| 2.2.2 测定样品的前处理 |
| 2.2.3 DES-kit的操作步骤 |
| 2.2.4 结果判定 |
| 2.3 DES-Kit的性能测定 |
| 2.3.1 准确度 |
| 2.3.2 精密度 |
| 2.3.3 特异性 |
| 2.3.4 灵敏度(检测限) |
| 2.3.5 稳定性 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 DES检测ci-ELISA反应条件的优化 |
| 3.1.1 DES-OVA包被浓度和DEESMcAb工作浓度的选取 |
| 3.1.2 GaMIgG-HRP稀释浓度的选取 |
| 3.1.3 DES-OVA包被时间的选取 |
| 3.1.4 封闭液、封闭时间的选取 |
| 3.1.5 TMB显色液显色时间的选取 |
| 3.1.6 标准曲线的绘制与曲线拟合 |
| 3.2 DES检测ci-ELISA反应体系的建立 |
| 3.3 DES-Kit的性能测定 |
| 3.3.1 准确度检测结果 |
| 3.3.2 精密度检测结果 |
| 3.3.3 特异性检测结果 |
| 3.3.4 灵敏度检测结果 |
| 3.3.5 稳定性检测结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 小分子半抗原的ELISA检测技术的反应模式 |
| 4.2 ELISA的各个关键技术环节 |
| 4.2.1 包被结果 |
| 4.2.2 封闭效果 |
| 4.2.3 GaMIgG-HRP的稀释浓度 |
| 4.3 DES-Kit的质量特性 |
| 4.4 测定样品的添加回收率 |
| 4.5 样品的提取及纯化 |
| 5 小结 |
| 第五章 己烯雌酚残留快速检测免疫金标试纸的制备、性能测定 |
| 1 材料 |
| 1.1 试剂 |
| 1.2 主要仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 DES McAb的制备与纯化 |
| 2.2 胶体金的制备、质量鉴定 |
| 2.2.1 胶体金的制备 |
| 2.2.2 胶体金的质量鉴定 |
| 2.3 胶体金标记抗体 |
| 2.3.1 胶体金溶液和将要标记的DES McAb的前处理 |
| 2.3.2 DES McAb最优胶体金标记浓度的选取 |
| 2.3.3 胶体金标记DES McAb |
| 2.4 检测试纸的制备 |
| 2.4.1 金标抗体(Au-McAb)玻璃纤维棉的处理 |
| 2.4.2 NC膜印迹的制备 |
| 2.4.3 检测试纸的组装 |
| 2.5 试纸检测方法的建立 |
| 2.5.1 目测半定量测定法的建立 |
| 2.5.2 机读定量测定法的建立 |
| 2.6 测定样品的前处理 |
| 2.7 DES-strip的性能测定 |
| 2.7.1 重复性检测 |
| 2.7.2 敏感性检测 |
| 2.7.3 有效期检测 |
| 2.7.4 特异性检测 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 胶体金的质量鉴定 |
| 3.1.1 紫外可见扫描 |
| 3.1.2 投射电镜扫描 |
| 3.2 DES McAb最优胶体金标记浓度的选取 |
| 3.3 DES-Strip的组装 |
| 3.4 DES-Strip检测方法的建立 |
| 3.4.1 定量机读测定法的建立 |
| 3.4.2 半定量目测测定法、检出限 |
| 3.5 DES-strip的性能测定 |
| 3.5.1 重复性检测 |
| 3.5.2 敏感性检测 |
| 3.5.3 有效期检测 |
| 3.5.4 特异性检测 |
| 4 讨论 |
| 4.1 胶体金的制备 |
| 4.1.1 胶体金的还原技术 |
| 4.1.2 胶体金颗粒直径的选取 |
| 4.1.3 胶体金的质量评定 |
| 4.2 胶体金标记DES McAb |
| 4.2.1 胶体金标记DES McAb时的pH值的选取 |
| 4.2.2 胶体金标记DES McAb最优浓度的选取 |
| 4.3 硝酸纤维素膜的选取 |
| 4.4 DES-strip的检测原理 |
| 4.5 DES-strip的质量特性 |
| 5 小结 |
| 第六章 DES-KIT、DES-STRIP和GC-MS、HPLC确证方法的对比 |
| 1 材料 |
| 1.1 主要试剂 |
| 1.2 主要仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 实验动物的饲喂 |
| 2.2 DES-Kit、DES-Strip法标准品配制及测定 |
| 2.3 GC-MS法标准品配制及检测 |
| 2.3.1 标准品配制 |
| 2.3.2 固相萃取 |
| 2.3.3 衍生化处理 |
| 2.3.4 确定GC-MS检测条件 |
| 2.3.5 绘制标准曲线、得出回收率 |
| 2.4 HPLC法标准品的配制及检测 |
| 2.4.1 标准品配制 |
| 2.4.2 检测波长的选择 |
| 2.4.3 流动相的筛选 |
| 2.4.4 色谱条件的确定 |
| 2.4.5 绘制标准曲线、得出回收率 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 DES-Kit、DES-Strip和GC-MS、HPLC技术参数的对比 |
| 3.2 DES-Kit、DES-Strip与HPLC的对比 |
| 3.3 DES-Kit、DES-Strip与GC-MS的对比 |
| 3.4 DES-Kit、DES-Strip和GC-MS检测猪尿液中DES含量的结果对比 |
| 4 讨论 |
| 4.1 测定DES含量方法的标准 |
| 4.2 DES不同测定技术灵敏性的对比 |
| 4.3 DES残留不同检测技术所需时间和费用的对比 |
| 5 小结 |
| 研究结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 博士期间的研究成果 |
（10）己烯雌酚和双烯雌酚对生物的影响及分析方法研究进展（论文提纲范文）
| 1 己烯雌酚和双烯雌酚性质及应用 |
| 2 对生物的影响 |
| 2. 1 对水生生物的影响 |
| 2. 2 对哺乳动物的影响 |
| 3 己烯雌酚和双烯雌酚的检测方法 |
| 3. 1 样品预处理方法 |
| 3. 2 仪器分析方法 |
| 3. 2. 1 气相色谱法及气相色谱质谱法 |
| 3. 2. 2 高效液相色谱法及液相色谱质谱法 |
| 3. 2. 3 免疫分析法 |
| 3. 2. 4 毛细管电泳法 |
| 4 展望 |
四、肌肉中已烷雌酚的GC-MS测定（论文参考文献）
- [1]动物源食品中兽药残留的高通量筛查方法研究[D]. 郭添荣. 成都大学, 2021(07)
- [2]纳米氧化铜及电化学活化修饰电极的制备与应用[D]. 肖雨萌. 辽宁师范大学, 2020(02)
- [3]典型雌激素分析方法建立及其在洱海和污水处理厂中的分布特征[D]. 袁宏宇. 上海交通大学, 2020(01)
- [4]己烯雌酚残留检测研究进展[J]. 冒玉娟,王婧,刘佳敏,张盼盼. 畜牧与饲料科学, 2019(05)
- [5]中药饲料添加剂中同时检测7种非法添加物的HPLC方法的建立[D]. 张昵昵. 安徽农业大学, 2019(05)
- [6]4类风险因子检测技术的建立及在电商水产品中的应用[D]. 范栋杰. 浙江海洋大学, 2019
- [7]动物源性食品中性激素检测方法的比较分析[J]. 周秋玲,娄婷婷,王素英,张宏宇. 食品研究与开发, 2018(09)
- [8]动物源性食品中性激素残留的危害及检测方法[J]. 高旭东,黄鑫,郝宝成,陈士恩,梁剑平. 黑龙江畜牧兽医, 2015(21)
- [9]己烯雌酚残留免疫学快速检测研究[D]. 杨兴东. 四川农业大学, 2015(12)
- [10]己烯雌酚和双烯雌酚对生物的影响及分析方法研究进展[J]. 徐英江,黄会,田秀慧,刘慧慧,薛敬林,孙岩,任传博,宫向红. 中国渔业质量与标准, 2014(05)